TRAM виявився ключовим для тривалого сигналу вродженого імунітету
Дослідники з’ясували, що білок TRAM допомагає підтримувати сигнали Toll-подібних рецепторів у макрофагах.
Дослідники встановили, що адаптерний білок TRAM допомагає імунним клітинам вивільняти та дозрівати комплекси MyD88, або міддосоми, після розпізнавання бактеріальних компонентів. Це дає змогу підтримувати сигналізацію Toll-подібних рецепторів, які запускають запальну відповідь. Про результати дослідження повідомляє Nature.
Автори працювали з імморталізованими макрофагами кісткового мозку мишей. Після стимуляції ліпополісахаридом — компонентом бактеріальної клітинної стінки, який активує рецептор TLR4, — клітини з міддосомами продукували IL-6 і TNF та запускали характерну програму експресії генів. Клітини без таких комплексів мали інший профіль активності генів, хоча реагували на інтерферони та інші сигнали, вироблені сусідніми клітинами.
Пошук регулятора міддосом
За допомогою повногеномного CRISPR-скринінгу вчені шукали гени, потрібні для формування міддосом і активації NF-κB. Одним із ключових результатів став ген Ticam2, який кодує TRAM. Раніше TRAM пов’язували передусім із MyD88-незалежним шляхом сигналізації TLR, зокрема з передаванням сигналу від TLR4 до TRIF та індукцією інтерферону.
У клітинах без TRAM початкові комплекси MyD88 формувалися на плазматичній мембрані, але не відокремлювалися від неї. На відміну від звичайних клітин, де ці протоміддосоми зникали з мембрани переважно впродовж години та перетворювалися на зрілі сигнальні комплекси, у клітинах із вимкненим Ticam2 вони залишалися на місці й не збільшувалися.
Передчасне припинення сигналу
Біохімічні досліди показали, що у звичайних клітинах MyD88 спочатку взаємодіє з TLR4 і адаптером TIRAP, а потім переходить до комплексу з IRAK2, IRAK4 і TRAF6. TRAM з’являвся в цьому процесі під час переходу від протоміддосоми до зрілої міддосоми. За відсутності TRAM зв’язки MyD88 із рецептором та TIRAP зберігалися довше, а утворені комплекси зрештою ставали нестабільними.
Клітини без TRAM могли запустити активність NF-κB, MAPK і TBK1 після стимуляції, однак сигнал припинявся передчасно. Особливо помітним це було для NF-κB і TBK1: у звичайних клітинах їхня активність зберігалася до 12 годин, тоді як дефіцит TRAM не дозволяв підтримувати відповідь. Автори дійшли висновку, що TRAM спрямовує дозрівання міддосом, вивільняючи їх від рецепторів і забезпечуючи тривалішу сигналізацію Toll-подібних рецепторів.
